Det halvt Cary Blair er en halvfast agar, der anvendes til transport og konservering af biologiske prøver, der huser tarmpatogener, labile og anaerobe mikroorganismer. Som ethvert transportmiddel er dens funktion at holde prøven i optimale forhold, indtil den dyrkes. De tilstedeværende patogene mikroorganismer såvel som den ledsagende mikrobiota skal forblive levedygtige, men uden at øge deres befolkning..
Cary Blair Medium er resultatet af formuleringsændringen af Stuart Transport Medium. Modifikationen blev udført i 1964 og bestod af at erstatte pH-reguleringssystemet (glycerophosphat) med en uorganisk phosphatbuffer..
Omformuleringen var nødvendig, fordi dens skabere indså, at glycerophosphat efter en vis tid kunne metaboliseres af nogle saprofytiske bakterier. Disse overlapper de tilstedeværende patogener.
Andre ændringer var eliminering af methylenblåt såvel som en omjustering af pH mod alkalinitet (pH 8,4). Alle disse ændringer forbedrede effektiviteten af transportmidlerne.
Oprindeligt blev Cary Blair-mediet brugt til vedligeholdelse af tarmpatogener, såsom Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae og Campylobacter sp.
Senere har man imidlertid set effektiviteten til at bevare levedygtigheden af krævende og labile patogene mikroorganismer, såsom: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae og nogle anaerober.
Artikelindeks
Cary Blair Medium indeholder natriumchlorid, natriumthioglycolat, dinatriumphosphat, calciumchlorid og agar.
Natriumchlorid opretholder den osmotiske balance i mediet, dinatriumphosphat og calciumchlorid balancerer pH. På sin side opretholder natriumthioglycollat et lavt oxidationsreduktionspotentiale, mens den lille del af agar giver den halvfaste konsistens..
Cary Blair-medium indeholder ikke næringsstoffer, da transportmediets funktion er at opretholde prøven uden at den gennemgår ændringer med hensyn til fugt og mikrobiel belastning; det vil sige, det undgår dehydrering af prøven, samtidig med at levedygtigheden og mængden af de tilstedeværende mikroorganismer bevares.
Endelig forhindrer den let alkaliske pH mikroorganismernes død ved syreindhold, især Vibrios er meget følsomme over for syrer.
Cary Blair-medier er kommercielt tilgængelige som en speciel brugsklar enhed. Transportsystemet er dækket af en plastisk Peel Pack-pose. Inde i den indeholder en vatpind til opsamling af prøven og beholderrøret til Cary Blairs halvfast medium..
Også på markedet er der kommercielle huse, der leverer det dehydratiserede medium til dets forberedelse i laboratoriet..
For at gøre dette skal du veje 13,2 g af det dehydratiserede medium og opløse det i en liter destilleret vand. Opvarm præparatet, indtil det er helt opløst. Fordel mediet i skruelågede reagensglas (bakelit).
Damp rørene i 15 minutter. Lad afkøle og opbevares ved stuetemperatur indtil brug.
Uinokuleret Cary Blair-medium kan opbevares optimalt i op til 18 måneder ved stuetemperatur.
Mediets pH skal justeres til 8,4 ± 0,2. Farven på det tilberedte medium er beige med en smule uklarhed.
Cary Blair Medium bruges, når prøver med afføring, rektal vatpind og vaginal vatpind ikke kan behandles med det samme.
Når der ikke er noget transportmiddel tilgængeligt, kan prøver opbevares ved -70 ° C.
Pinden imprægneres med prøven, og den indføres i Cary Blair-mediet uden at nå bunden.
Cary Blair-mediet skal have en etiket, hvor grundlæggende data placeres, såsom: patientens for- og efternavn, prøveens identifikationsnummer, prøveindsamlingens kilde, behandlende læge, dato og klokkeslæt for indsamlingen. , formodet diagnose, antibiotikabehandling.
Tæt dækket og transporteret ved stuetemperatur til fækale prøver. Til vaginale prøver på jagt efter anaerobe mikroorganismer anbefales det at transportere prøverne ved 4 ° C.
I alle tilfælde er den anbefalede overførselstid 4-6 timer med et maksimum på 24 timer..
Hvis tilstedeværelsen af Campylobacter jejuni i afføringsprøver, og disse kan ikke behandles inden for 24 timer, anbefales opbevaring i Cary Blair-medium ved 4 ° C.
Flere undersøgelser har vist, at Cary Blair-medium kan forblive levedygtigt for enteropatogene mikroorganismer af slægten Shigella og Salmonella i op til 49 dage efter udtagning af prøven..
For hans del, Vibrio cholerae, et andet vigtigt tarmpatogen er i stand til at overleve i 22 dage, mens Yersinia pestis (forårsagende middel til luft- og lungepest) kan genvindes efter 75 dage.
På trods af den påviste holdbarhed med hensyn til genopretning af disse mikroorganismer anbefales det imidlertid, at de udtagne prøver transporteres i Cary Blair-mediet til laboratoriet så hurtigt som muligt..
Når prøven når laboratoriet, skal den ligeledes sås uden forsinkelse i de respektive dyrkningsmedier..
På den anden side anbefales Cary Blair-mediet ud over at være nyttigt til transport af fakultative mikroorganismer også til prøver, der indeholder anaerobe patogener..
I denne forstand gennemførte DeMarco og samarbejdspartnere i 2017 en undersøgelse med titlen: Overlevelse af vaginale mikroorganismer i tre kommercielt tilgængelige transportsystemer.
De demonstrerede, at Cary Blair Transport Medium er det bedste transportmedium til konservering og genopretning af vaginale anaerobe mikroorganismer. Ligeledes viste de, at den højeste genvindingshastighed blev opnået, når overføringstemperaturen var 4 ° C..
Derfor konkluderes det, at transporttemperaturen for vaginale podninger (anaerobe mikroorganismer) skal være ved 4 ° C. Mens det er fækale prøver, der leder efter fakultative mikroorganismer, er den ideelle temperatur stuetemperatur..
Stammer kendt som Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae Y Campylobacter sp.
Mediet inokuleres med den valgte stamme og holdes ved stuetemperatur i 24 timer. De sås derefter i de tilsvarende kulturmedier. I alle tilfælde forventes en tilfredsstillende genopretning af den pågældende mikroorganisme..
Endnu ingen kommentarer