Det isolering af mikroorganismer involverer et sæt teknikker, der bruges til at udvinde og adskille arterne af mikrober af interesse fra deres naturlige habitat til et habitat in vitro. Disse teknikker er et sæt af mange grundlæggende og nødvendige værktøjer til mikrobiologiske studier..
De fleste af de kendte mikroorganismer, og som er blevet defineret af videnskaben, er dem, der har været i stand til at blive isoleret og opbevaret i beholdere, der til dels simulerer de iboende forhold på de steder, hvor de bor..
Måske var en af de første mænd, der praktiserede isoleringen af mikroorganismer, Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723), der indsamlede og isolerede prøver af mikrober fra et stort antal steder og økosystemer for at observere dem nøje under de hundreder af mikroskoper, som han designede..
Det var imidlertid først i forskerne Louis Pasteurs og Robert Kochs tid i løbet af det 19. århundrede, at der begyndte at udføres streng praksis, der tjente til at isolere specifikke mikroorganismer, alt sammen for at være i stand til at studere dem i detalje..
I modsætning til Leeuwenhoek fokuserede disse forskere på at isolere definerede arter fra de andre mikroberarter i miljøet. Derudover var de interesserede i at holde dem i live så længe som muligt uden for deres naturlige miljø..
På nuværende tidspunkt er der udviklet præcise teknikker til isolering og vækst af mange forskellige mikroorganismer opnået fra næsten ethvert miljø på biosfæren..
Artikelindeks
Alle mikroorganismeisolationer begynder med indsamling af en prøve i naturen, hvor mikroorganismerne af interesse findes. Disse steder kan være sår i dyre- eller plantevæv, jord eller underlag, vandpytter, have, overflader såsom hud osv..
Prøveudtagningen udføres ved at berøre eller støtte en beholder, der har et medium med de relevante krav til vækst af mikroorganismer på overfladen, hvorfra det ønskes at isolere. I denne beholder får du det, der er kendt som en "kultur" af mikrober..
Generelt er den første afgrøde, der opnås fra naturlige levesteder, utvivlsomt en "blandet afgrøde", dvs. den består af et stort antal forskellige arter af mikrober..
Imidlertid kan de fleste arter af mikroorganismer isoleres fra hinanden i laboratoriet, idet de søger at opnå mikroorganismekulturer, hvor kun arten af interesse vokser eller med andre ord opnåelse af "rene kulturer".
I det væsentlige er den proces, der udføres for at opnå "rene kulturer" det, der er kendt som "isolering af mikroorganismer".
Der er et stort antal teknikker til isolering af mikroorganismer, og der er endda nogle specifikke for en bestemt type mikroorganisme, især. I andre tilfælde er det kun muligt at opnå en ren kultur ved at samle prøven fra det naturlige miljø..
Blandt de isoleringsteknikker, der mest bruges til at adskille en art af interesse, der findes i blandede kulturmedier, er:
Måske er dette den mest anvendte metode til isolering af mikroorganismer. Denne teknik består i at fremstille et sterilt fast medium med alle de ernæringsmæssige forbindelser, der er nødvendige for væksten af mikroorganismen i en glasbeholder, såsom en petriskål..
Ved anvendelse af et fint, generelt spids instrument berøres mikroorganismen, der skal isoleres i den blandede kultur, og derefter, i det sterile faste medium, begynder spidsen af instrumentet, hvormed mikroorganismen blev berørt, at glide fra side til side gennem hele nummerplade.
Dette gøres intensivt frem og tilbage over overfladen af det faste eller agariserede medium, som om det var en zig-zag. Dette gøres normalt, indtil ca. en tredjedel af diameteren af agaren på pladen er dækket..
Til denne metode udføres en fortynding af mediet, hvor de indsamlede mikrober lever, til det punkt, hvor der kun er et par hundrede celler tilbage for hver milliliter af mediet, hvor de blev fortyndet..
Fra denne fortynding tages et par milliliter og blandes med det medium, der tilsættes i beholderen, før den størkner. Da der fremstilles en blanding mellem det agariserede medium og det flydende medium, hvor mikroorganismerne er, forbliver de nedsænket i mediet og er kun synlige, indtil de formerer sig i form af en koloni..
Efterhånden som de udvikler sig som en koloni, bliver det lettere at adskille dem fra resten af mikroorganismer med andre metoder såsom ridser, for eksempel.
Denne metode består i at fremstille seriefortyndinger af mediet, hvor mikroorganismerne findes. Et eksempel på dette er de fortyndinger, der er lavet til oprensning Lactococcus lactis eller Lactobacillus acidophilus, bakterier, der er ansvarlige for produktionen af ost og yoghurt.
Cirka 1 milliliter tages fra et rør indeholdende surmælk eller tidligere gæret yoghurt, og denne milliliter podes i steril mælk uden mikroorganismer. Senere udtages ca. en ml af mælken, og processen gentages.
Dette gentages cirka tre eller fire gange i træk, hvilket sandsynligvis opnås Lactococcus lactis eller Lactobacillus acidophilus i et medium isoleret fra forurenende stoffer, der kan repræsentere andre mikrober.
Denne metode opnås ved at dyrke mikroorganismerne i dyrkningsmedier med betingelser, der stimulerer eller letter væksten af arten af interesse og i mange tilfælde under betingelser, der hæmmer væksten af andre forurenende mikroorganismer..
Bakterier af slægten Salmonella De vokser i kulturmedier beriget med selenit, da disse mikroorganismer omdanner selenit til selen for at metabolisere det. Seleniten i mediet gør det vanskeligt at assimilere næringsstofferne til andre mikroorganismer end salmonella..
Måske er dette den sværeste og mindst effektive teknik til isolering af mikrober. Det involverer at placere en dråbe af mediet (prøven), hvor mikroorganismerne er anbragt på et sterilt dækglas, og derefter placere det på mikroskopstadiet..
Senere, mens man observerer, fjernes en enkelt celle ved hjælp af en steril mikropipette. Dråben anbringes på et andet sterilt dækglas, der inkuberes ved den passende temperatur for mikroorganismen. Endelig observeres det igen under mikroskopet for at vise væksten.
Hvis der er udviklet nye celler fra den enkelte celle taget ved genobservation, tilsættes de til et sterilt dyrkningsmedium for at opnå en fuldt isoleret ren kultur..
Der er utallige forskellige mikrober på planeten Jorden, der er spredt over næsten alle kendte økosystemer. Nogle mikroorganismer er kendt som ekstremofiler og kræver unikke betingelser for deres udvikling og vækst..
Disse ekstreme forhold er både fordelagtige og ugunstige til isolering, da de, selvom de kun tillader vækst af disse mikroorganismer, kan være vanskelige at genskabe in vitro.
Isolering af mikroorganismer har repræsenteret et af de vigtigste fremskridt inden for videnskab og medicin. Dette har gjort det muligt for menneskeheden at studere og udvikle effektive behandlinger mod forskellige mikrobielle patogener..
På nuværende tidspunkt er det med sikkerhed kendt, at mikroorganismer udgør en væsentlig del af alle økosystemer, så at opnå isolering af nogle af dem med relativ betydning for mennesket giver forskere mulighed for at studere dem intensivt for at forstå dybtgående dens rolle i hvert økosystem.
Endnu ingen kommentarer