Det bakteriologisk sløjfe Det er et arbejdsinstrument, der anvendes af mikrobiologer til såning af mikrobielle kulturer (bakterier eller svampe). Det er måske det instrument, der er mest brugt af disse fagfolk.
Dens anvendelse virker enkel, men i virkeligheden kræver det en masse træning. Før såningen påbegyndes, skal sløjfen steriliseres i Bunsen-brænderen, hvorefter det mikrobielle inokulum, der kan komme fra en flydende kultur eller en fast kultur, tages..
Når podestoffet er taget, kan det deponeres i et flydende medium eller podes i et fast medium. Efter hver procedure steriliseres sløjfen igen. Håndtaget tjener også til at lave mikrobielle udstrygninger på et dias.
Den bakteriologiske sløjfe har mange navne, herunder: platinsløjfe eller sløjfe, inokulationssløjfe eller såningsløjfe, men dens rigtige navn er Kohle-sløjfe..
Det materiale, som håndtaget er fremstillet af, er generelt en nikkel-kromlegering (nichrom) eller også platin. En anden sort tilgængelig på markedet er de engangsbakteriologiske sløjfer af plast..
På den anden side er der flere typer bakteriologiske sløjfer, hver udfører en funktion inden for de opgaver, der udføres af en mikrobiolog. Valget af håndtag afhænger af, hvad der skal gøres.
For eksempel for at udføre et striatum på grund af udtømning for at isolere en mikroorganisme, anvendes platinasløjfen, der ender i en lukket ring, uanset om den er kalibreret eller ej..
Mens det er nødvendigt at så en urinprøve, hvor det er vigtigt at kvantificere CFU'er, er det nødvendigt at bruge den kalibrerede sløjfe. På samme måde er nålesløjfe afgørende for at inokulere biokemiske tests, der skal sås ved punktering. Det er vigtigt, at håndtaget håndteres af uddannet personale.
Artikelindeks
Bakteriologiske sløjfer består af to ekstremer. Den ene ende svarer til håndtaget eller basen, mens den anden er selve håndtaget.
Basen tjener til at gribe håndtaget under håndtering. Det er normalt metallisk, men har en varmeisolator, der forhindrer operatøren i at blive brændt, når spidsen af håndtaget steriliseres på lighteren. Den måler ca. 20 cm, selvom den kan være længere. Den har en tråd til justering af håndtaget.
Det er den funktionelle ende, det vil sige det er den del, der kommer i kontakt med mikroorganismer og med kulturmediet. Den består af en fin ledning, der indsættes i basen.
Håndtaget kan være lavet af nichrom eller platin, derfor kaldes det undertiden et platinahåndtag. Den er ca. 6,5 cm lang og har en måler på ca. 0,20 mm. Håndtaget med håndtaget kan måle 26,5 cm. Målingerne kan variere fra producent til producent.
Der er flere typer bakteriologiske sløjfer, og hver har en bestemt anvendelse. Håndtagstyperne er som følger: kalibreret ringformet håndtag, ikke-kalibreret ringformet håndtag, lige eller nålehåndtag, spatuleret håndtag, “L” -formet håndtag og skarpt håndtag.
På den anden side kan håndtagene være permanente eller engangsbrug. De til permanent brug steriliseres i lighter, er genanvendelige og meget holdbare. Mens engangsartikler er sterile fra fabrikken, bruges de kun én gang og kasseres..
Det er det mest anvendte håndtag i mikrobiologilaboratoriet. Det bruges til at tage et inokulum fra en mikrobiel suspension (flydende medium) eller en del af kolonien (fast medium), der skal podes i et andet kulturmedium, enten en biokemisk test eller et mere beriget eller selektivt medium, alt efter omstændighederne . Også nyttig til fremstilling af mikrobielle udstrygninger på et dias.
Med denne type sløjfe kan det oprindelige inokulum stribes. Det er også designet, så det glider glat på agaren uden at beskadige det. Selvfølgelig kræver dette et uddannet personale til at håndtere såningsteknikken ved at anvende den korrekte kraft og bevægelser for at gøre en god striering..
Med dette håndtag kan forskellige såningsteknikker udføres. Eksempel, faste medier i petriskåle frøes normalt ved udmattelse (der er flere teknikker, se video 1).
Denne teknik sigter mod at opnå isolerede kolonier for at kunne studere og identificere dem, især når prøven er polymikrobiel, det vil sige kulturen ikke er ren (den indeholder mere end en type mikroorganisme)..
I stedet plantes kilerne i en simpel zigzag for at opnå bakteriemasse, hvilket i dette tilfælde ikke er nødvendigt at isolere kolonier.
Nogle gange bruges de også til at tage bestemte prøver. For eksempel Rojas et al. Brugte den bakteriologiske sløjfe til at indsamle skrabede vaginale vævsprøver fra rotter..
Dette håndtag er, som navnet antyder, kalibreret til at tage en bestemt mængde mikrobiel suspension. Det bruges, når det er nødvendigt for inokulatet at overholde det, der er standardiseret i teknikken.
For eksempel er det meget almindeligt at plante urinkulturer. I dette tilfælde kan en kalibreret sløjfe på 0,01 ml og en på 0,001 ml anvendes..
Det skal bemærkes, at kalibrerede håndtag har en fejlmargin, der varierer alt efter den vinkel, hvormed prøven tages, og størrelsen på beholderens mund..
Hvis 0,001 ml håndtaget indsættes lodret i en beholder med en lille mund (≤ 7 mm), vil den optagne mængde være 50% mindre end ønsket.
Dette sker, fordi jo mindre diameteren på beholderens munding er, jo højere er overfladespændingen, og derfor hæves vedhæftningskræfterne mellem (glas - væske). Dette medfører, at væskebelastningen, som håndtaget tager, er mindre.
Hvis det tages i en vinkel på 45 ° i en beholder med en bred mund (≥ 22 mm), kan 150% mere end den krævede mængde opsamles. I dette tilfælde er overfladespændingen lavere, og samhørighedskræfterne i glas / plast falder, mens væske-væske-samhørighedskraften øges..
På grund af ovenstående foretrækkes andre metoder til kvantificering af kolonidannende enheder undertiden til urinkulturer..
Det kaldes også et trådhåndtag. Det bruges til at inokulere visse biokemiske tests, især dem der skal podes ved hjælp af punkteringsteknikken. Eksempel på halvfaste medier, der er fremstillet i form af en blok, såsom: SIM-medium, MIO og O / F.
Derudover er det i tilfælde af MIO og SIM, der vurderer bevægelighed, vigtigt at punktering udføres med en nålesløjfe, da fortolkningen af en positiv bevægelighed opstår, når bakterierne vokser mod siderne af det oprindelige inokulum..
En test podet med en loop-loop kan falske resultaterne (falsk positive). Af denne grund skal man ved denne type såning passe på, at punkteringen er unik, og at når den fjernes, kommer den ud i samme retning som den kom ind.
En anden test, der skal nåles, selvom den er fremstillet i en kileform, er Kligler. I denne test anbefales det ikke, at ilt trænger dybt ind i agaren, da der kræves et iltfattigt medium for at visse kemiske reaktioner skal forekomme. Dette håndtag bruges også til at røre ved en bestemt koloni for at subkulturere.
De fleste mikroorganismer giver bløde kolonier, der er lette at kaste. Der er dog nogle mikrobielle midler, hvis kolonier er hårde og tørre, for eksempel mycobakterier generelt og nogle svampe. I disse tilfælde er det nyttigt at bruge spatelhåndtaget.
Dens hyppigste anvendelse er at ringe svampekulturer, især forme..
Det er nyttigt at tage meget små kolonier til stede i polymikrobielle kulturer for at kunne subkulturere dem.
Håndtaget skal steriliseres før og efter brug. For at sterilisere den bakteriologiske sløjfe i lighteren skal du gøre som følger: håndtaget skal placeres øverst på flammen og indtage en så lodret position som muligt på en sådan måde, at den steriliseres fra spidsen opad..
Når den fine filament bliver rød, kan den siges at være steril. For at bruge det afkøles det, og den valgte prøve tages. (Se video 2).
Endnu ingen kommentarer