Stuart medium fundament, forberedelse og anvendelser

1788
Abraham McLaughlin

Det medium Stuart Det er en halvfast agar eller en bouillon uden næringsstoffer, der bruges til transport af biologiske prøver. Dens formål er at holde stammerne til stede i prøven levedygtige i et bestemt tidsrum, men uden at øge den mikrobielle population.

Det blev oprettet af Moffet, Young og Stuart i 1948 og senere modificeret af Toshach og Patsula. Den består af natriumglycerophosphat, natriumthioglycolat, calciumchlorid og agar-agar. Sidstnævnte er til stede i det halvfaste medium og fraværende i væsken. Nogle laboratorier tilføjer methylenblåt.

Kultur med Stuart-transport. Kilde: Af: CDC / Dr. Gilda Jones, høflighed: Public Health Image Library

De bruges generelt, når det ikke er muligt at så prøven med det samme. I dette tilfælde placeres prøven i transportmediet, mens den overføres til laboratoriet, der behandler kulturen..

På denne måde garanteres det, at de tilstedeværende mikroorganismer forbliver i live, indtil de inokuleres i det tilsvarende dyrkningsmedie..

Oprindeligt var dets anvendelse beregnet til at transportere urinrør eller vaginale prøver, hvor tilstedeværelsen af Neisseria gonorrhoeae. Senere indså de, at dets anvendelighed kunne være bredere.

Stuart-mediet viste sig at være meget effektivt til at bevare labile og krævende mikroorganismer, såsom Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzaeStreptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertussis, blandt andre. Ud over andre ikke-generende mikroorganismer såsom Enterobacteria.

Stuart-mediet undgår grundlæggende udtørring af prøven, opretholder den osmotiske balance og holder mikroorganismerne ved en ideel pH. På den anden side indeholder dette medium strategisk ikke næringsstoffer, hvilket forhindrer mikroorganismer i at formere sig.

På markedet er der specielle prøveudstyr, der indeholder dette eller andet transportmiddel, kaldet kulturette. De kan også fremstilles i laboratoriet.

Artikelindeks

  • 1 begrundelse
  • 2 Transportmidlets egenskaber
  • 3 Forberedelse
    • 3.1 Halvfast Stuart-medium med redox-indikator
    • 3.2 Flydende modificeret Stuart medium (hjemmelavet)
  • 4 anvendelser
  • 5 Identifikation af prøven i transportmidler
  • 6 Kvalitetskontrol
  • 7 Begrænsninger
  • 8 Referencer

Basis

Formålet med Stuart-transportmidlet er at holde prøverne så tæt på deres oprindelige tilstand, indtil de behandles..

Natriumglycerophosphat og calciumchlorid er et buffersystem, der fungerer ved at opretholde pH og osmolaritet..

I mellemtiden fungerer natriumthioglycollat ​​som et reduktionsmiddel, og i tilfælde af at indeholde agar giver dette det en halvfast konsistens for at forsinke iltningen af ​​mediet. Endelig er methylenblåt en oxidationsindikator, det vil sige det detekterer tilstedeværelsen af ​​ilt.

Det halvfaste medium med redoxindikator er ideel til transport af prøver, hvor der er mistanke om tilstedeværelsen af ​​anaerobe bakterier.

Transportmidlets egenskaber

Stuart-mediet opfylder ligesom alle transportmidler visse egenskaber, herunder:

-Vedligeholder levedygtige mikrobielle stammer til stede uden at formere sig.

-Indeholder ingen næringsstoffer; Dens forbindelser har til formål at holde prøven hydreret under passende betingelser med pH og osmolaritet.

-Hæmmer autolyzatet af nogle sarte mikroorganismer, såsom Pneumococcus.

-Dens anvendelse er midlertidig, den bør ikke forlænges for længe.

Forberedelse

Halvfast Stuart-medium med redox-indikator

Hjemmeforberedelse

ingredienser

Natriumglycerophosphat 10 gr

Natriumthioglycollat ​​1,0 gr

Calciumchlorid 0,1 gr

Methylenblåt 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Destilleret vand 1 l

Bland komponenterne og opvarm, indtil de er helt opløst. Hæld i rør eller specielle vatpinde. De indføres i autoklaven og steriliseres ved 121 ° C i 15 minutter. Lad rørene afkøle sig lodret (i form af et stik). Opbevares ved stuetemperatur.

Forberedelse med kommercielt medium

Vej 14,1 g af mediet i 1 liter destilleret vand. Varm omrøring ofte, indtil den er helt opløst, den kan koges. Resten af ​​proceduren som allerede beskrevet.

Det dehydratiserede medium er cremefarvet og tilberedt skal være blåt på overfladen. Dette skyldes tilstedeværelsen af ​​methylenblåt.

Mediets pH skal justeres til 7,4 ± 0,2

Flydende modificeret Stuart Medium (hjemmelavet)

ingredienser

Natriumglycerophosphat 10 gr

Natriumthioglycollat ​​1 gr

Calciumchloriddihydrat 0,1 gr

Destilleret vand 1000 ml

Det har de samme ingredienser som det halvfaste stof, men det har ikke agar eller methylenblåt. I dette tilfælde blandes komponenterne uden opvarmning, og 0,5 ml fordeles i 16 x 125 mm rør med skruelåg..

Det steriliseres i en autoklav ved 121 ° C i 10 minutter. Til prøveudtagning skal dacron-podepinde anvendes, hvis prøven er til PCR eller rayon, hvis den er til kultur.

Rørene opbevares ved stuetemperatur.

Ansøgninger

Kommercielt er der specielle prøvetransportanordninger kaldet culturette; Denne enhed er et langstrakt og tyndt rør, der har en vatpind indeni, og i slutningen er der et segment, der indeholder det halvfaste eller flydende Stuart-medium.

Enheden åbnes, og prøven tages med vatpinden. Derefter føres den tilbage i røret, indtil spidsen af ​​podepinden er indsat i det halvfaste transportmedium; nogle bringer en polyurethansvamp imprægneret med flydende Stuart-medium, hvorpå prøven konserveres ved at holde den våd.

I tilfælde af mistanke om tilstedeværelsen af ​​sarte mikroorganismer, bør der anvendes vatpind med kul til opsamling af prøven..

Prøverne, der kan tages med podepinde eller podepinde og overføres i dette medium, er svælgudsugninger, rektale podninger og forskellige sekreter, herunder: vaginal, urinrør, sår, øje, øre og byld..

Under overførslen af ​​prøven i transportmediet til laboratoriet skal det undgås at udsætte mediet for ekstreme miljøforhold (for koldt eller for varmt). Pludselige ændringer i atmosfæretryk bør også undgås.

Den tid, hvor mediet er i stand til at holde en mikroorganisme levedygtig, afhænger af den pågældende stamme. For mikroorganismer af slægten Neisserias og Haemophilus kan de for eksempel forblive levedygtige i op til 24 timer, men stammer såsom Salmonella eller Shigella kan vare dage og endda uger..

Hvis det anslås, at behandlingen af ​​prøven kan tage mere end 4 dage, foretrækkes det at fryse prøven ved -70 ° C.

Identifikation af prøven i transportmidler

Det forberedte transportmiddel eller den kommercielle kultur skal have en etiket, hvor følgende oplysninger placeres:

Patientens for- og efternavn: undgå forveksling af prøver.

Identifikationsnummer: det er praktisk at holde en ordre på arbejdspladsen.

Prøveindsamlingskilde: hjælper bakteriologen med at vælge det passende kulturmedium.

Behandlende læge: Nogle gange er det nødvendigt for mulige konsultationer.

Prøveudtagningsdato og -tidspunkt: Det er nødvendigt for accept eller afvisning af prøven i henhold til den forløbne tid mellem prøveudtagning og modtagelse i laboratoriet..

Andre oplysninger, der ville være meget nyttige at vedhæfte, er:

Den formodede diagnose: guider i tilføjelsen af ​​specielle kulturmedier i henhold til den diagnostiske mistanke.

Antibiotikabehandling: det er nyttigt at være bundet til antibiogrammet.

Al denne information er afgørende for at garantere god behandling af prøven..

QA

For at evaluere ydeevnen for Stuart-mediet kan kendte stammer inokuleres og holdes ved 25 ° C, såsom: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

I alle tilfælde forventes det at genvinde den pågældende mikroorganisme, bevaret i 24 timer..

På den anden side kan andre stammer bruges, såsom: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 og Escherichia coli ATCC 11775.

I alle tilfælde forventes rigelig opsving i op til 96 timer..

Begrænsninger

Nogle undersøgelser sikrer, at glycerophosphatet, der er til stede i Stuart-mediet, kan metaboliseres af nogle coliforme stoffer, blandt andre gramnegative bakterier, og derfor formere sig i dette medium..

Denne risiko øges jo længere prøvebehandlingen er forsinket. Ligeledes påvirker eksponeringen af ​​Stuart-mediet for høje temperaturer under dets overførsel netop dette.

Referencer

  1. "Transportmedium (mikrobiologi)." Wikipedia, The Free Encyclopedia. 13. apr 2018, 10:36 UTC. 1. april 2019. Tilgængelig på: es.wikipedia.org
  2. Microkit Laboratories: Culture Media. Stuart-transport. Tilgængelig på: Tilgængelig på: Medioscultivo.com
  3. LabLisan. Stuarts transportmiddel. Fås på: lablinsan.cl
  4. Videnskabelig MDM. Fordelene ved at have Stuart mikrobiologiske transportmidler. Tilgængelig på: mdmcientifica.com
  5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017. Tilgængelig på: metrixlab.mx
  6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12. udgave Redaktionel Panamericana S.A. Argentina.
  7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. udgave Redaktionel Panamericana S.A. Argentina.

Endnu ingen kommentarer