Det nefelometri består i at måle strålingen forårsaget af partikler (i opløsning eller i suspension) og således måle effekten af den spredte stråling i en anden vinkel end retningen for den indfaldende stråling.
Når en suspenderet partikel rammes af en lysstråle, er der en del af lyset, der reflekteres, en anden del absorberes, en anden afbøjes, og resten transmitteres. Dette er grunden til, at når lyset rammer et gennemsigtigt medium, hvor der er en suspension af faste partikler, virker suspensionen uklar..
Artikelindeks
I det øjeblik, hvor en lysstråle rammer partiklerne af et stof i suspension, ændrer strålens udbredelsesretning sin retning. Denne effekt afhænger af følgende aspekter:
1. partiklens dimensioner (størrelse og form).
2. suspensionens egenskaber (koncentration).
3. bølgelængde og lysintensitet.
4. uheld lys afstand.
5. afsløringsvinkel.
6.Brydningsindeks for mediet.
Nephelometeret er et instrument, der bruges til at måle suspenderede partikler i en flydende prøve eller i en gas. Så en fotocelle placeret i en vinkel på 90 ° i forhold til en lyskilde registrerer stråling fra partikler, der er til stede i suspensionen..
Også det lys, der reflekteres af partiklerne mod fotocellen, afhænger af partiklernes tæthed. Diagram 1 viser de grundlæggende komponenter, der udgør et nefelometer:
I nefelometri er det meget vigtigt at have en strålingskilde med høj lysudgang. Der findes forskellige typer, der spænder fra blandt andet xenonlamper og kviksølvdamplamper, wolframhalogenlamper, laserstråling..
Dette system er placeret mellem strålingskilden og kuvetten, således at stråling med forskellige bølgelængder i forhold til den ønskede stråling på kyvetten undgås på denne måde..
Ellers vil fluorescensreaktioner eller varmeeffekter i opløsningen forårsage afvigelser fra målingen..
Det er en generelt prismatisk eller cylindrisk beholder, og den kan have forskellige størrelser. I dette finder du den løsning, der undersøges.
Detektoren er placeret i en bestemt afstand (generelt meget tæt på kyvetten) og har ansvaret for at detektere strålingen spredt af partiklerne i suspensionen..
Generelt er det en elektronisk maskine, der modtager, konverterer og behandler data, som i dette tilfælde er målingerne opnået fra den udførte undersøgelse..
Hver måling er underlagt en procentdel af fejl, som hovedsagelig gives af:
Forurenede kuvetter: i kuvetterne reducerer ethvert middel uden for den undersøgte opløsning, hvad enten det er inden i eller uden for kuvetten, det strålende lys på vej til detektoren (defekte kuvetter, støv, der klæber til kuvettens vægge).
Interferens: tilstedeværelsen af noget mikrobielt forurenende stof eller uklarhed spreder strålingsenergien og øger dispersionsintensiteten.
Fluorescerende forbindelser: disse er de forbindelser, der, når de exciteres af indfaldende stråling, forårsager fejlagtige og høje spredningsdensitetsmålinger.
Opbevaring af reagenser: forkert systemtemperatur kan forårsage ugunstige undersøgelsesbetingelser og vil tilskynde tilstedeværelsen af uklare eller udfældede reagenser.
Udsving i elektrisk kraft: For at forhindre, at indfaldende stråling er en fejlkilde, anbefales spændingsstabilisatorer til ensartet stråling.
Da strålingseffekten af den opdagede stråling er direkte proportional med partiklernes massekoncentration, har nefelometriske undersøgelser-i teorien- en højere metrologisk følsomhed end andre lignende metoder (såsom turbidimetri).
Derudover kræver denne teknik fortyndede opløsninger. Dette gør det muligt at minimere både absorption og refleksionsfænomener..
Nephelometriske studier indtager en meget vigtig position i kliniske laboratorier. Anvendelser spænder fra bestemmelse af immunoglobuliner og akutte fase proteiner, komplement og koagulation.
Når en biologisk prøve indeholder et antigen af interesse, blandes den (i en bufferopløsning) med et antistof til dannelse af et immunkompleks..
Nephelometry måler mængden af lys, der spredes af antigen-antistofreaktionen (Ag-Ac), og på denne måde detekteres immunkomplekser.
Denne undersøgelse kan udføres ved to metoder:
Denne teknik kan bruges til slutpunktsanalyse, hvor antistoffet fra den undersøgte biologiske prøve inkuberes i 24 timer..
Ag-Ac-komplekset måles ved hjælp af et nefelometer, og mængden af spredt lys sammenlignes med den samme måling, der blev udført, før komplekset blev dannet..
I denne metode overvåges hastigheden af kompleks dannelse kontinuerligt. Reaktionshastigheden afhænger af koncentrationen af antigenet i prøven. Her tages målingerne som en funktion af tiden, så den første måling tages på tidspunktet "nul" (t = 0).
Kinetisk nefelometri er den mest anvendte teknik, da undersøgelsen kan udføres på 1 time sammenlignet med slutpunktsmetodens lange periode. Dispersionsforholdet måles lige efter tilsætning af reagenset.
Derfor, så længe reagenset er konstant, betragtes mængden af tilstedeværende antigen direkte proportional med ændringshastigheden.
Nephelometry bruges generelt til vandkemisk kvalitetsanalyse for at bestemme klarhed og kontrollere dens behandlingsprocesser..
Det bruges også til at måle luftforurening, hvor koncentrationen af partiklerne bestemmes ud fra den dispersion, de producerer i et indfaldende lys..
Endnu ingen kommentarer