Det Congo rød er et azofarvestof til proteiner dannet ved kobling af et diazoniumsalt og en aktiv aromatisk ring. Dette stof er i stand til at absorbere elektromagnetisk stråling i det synlige spektrum, hvorfor det har en intens farve.
Det er negativt ladet. Derfor har det en affinitet for positivt ladede cellulære komponenter, såsom visse proteinstoffer. Dens farve varierer alt efter pH. I denne forstand, hvis mediet er surt (< de pH3), el color es azul intenso. Entre pH3 - pH 5,2 es fucsia (zona de viraje), y con >pH 5,2 er farven dyb rød.
Det er et meget alsidigt stof, da det har flere anvendelser. Det er blevet brugt som farvestof i tekstilindustrien og også til celler og tekstiler.
Også at udføre dyrkningsmedier, der måler enzymatisk virkning, som en pH-indikator, som et kontrolstof i evalueringen af, om spektrofotometre fungerer korrekt, i studiet af dannelse af biofilm eller i diagnosen amyloid..
Ligeledes har det gjort det muligt at skelne mellem bakterielle og svampeserotyper ved at identificere specifikke strukturer i deres væg (lipopolysaccharider)..
Artikelindeks
Dette stof blev opdaget af Böttiger i 1884. Det er et diazoniumderivat dannet af bis-diazoinsyren af benzidin med naphthionsyre. Det røde Congo-molekyle måler 21 Armstrong, og molekylvægten er ca. 8000 g / mol..
Congorød er karakteriseret ved at være opløselig i vand og endnu mere i organiske opløsningsmidler som ethanol og danne en kolloid opløsning.
Har en affinitet for cellulose, amyloidvæv og positivt ladede cellulære komponenter.
Congo Red fremstilles i forskellige koncentrationer afhængigt af den teknik, der skal bruges. De fleste bruger blandt andet Congo rød ved 1%, 2%, 0,1%.
For eksempel, for at fremstille 2% Congo rød, skal der vejes 2 g dehydreret madfarve og tilsættes 100 ml destilleret vand. Derefter opbevares den i en ravfarvet flaske.
I en periode blev det meget brugt i tekstilindustrien på grund af dets fiksering på bomuld, men i øjeblikket er det i brug, fordi det er kræftfremkaldende, og også fordi farven ikke er stabil og misfarves af friktion..
Den biofilmdannende kapacitet af mikroorganismer har vist sig at være en virulensfaktor.
I denne forstand anvendes Congo rødt farvestof som en metode til bestemmelse af dannelse af biofilm. Congorød binder sig til de exopolysaccharider, der findes i biofilmen. Sammenlignet med andre metoder anbefales det dog mindst på grund af de høje falske negativer, der opstår.
Metoden bruger Congo rød agar, den består af blodagar som base, glukose (10 g / l) og Congo rødfarvestof (0,4 g / l). De stammer, der skal evalueres, podes i mediet og inkuberes i 24 timer ved 37 ° C og inkuberes derefter i 48 timer ved stuetemperatur..
En positiv test påvises, hvis der observeres krystallinske kolonier med sort farve og tørt udseende.
For at vurdere, om et absorbans- eller transaktionsmåleapparat overholder de fotometriske parametre, der er fastlagt ved internationale regler, kan en simpel teknik bruges til at fastslå, om udstyret udsender resultater inden for acceptabilitetsområdet..
En af evalueringsteknikkerne er at bruge Congo red, baseret på det isosbestic-punkt.
Det isosbestiske punkt er den bølgelængde, ved hvilken Congorød udsender den samme absorbans uafhængigt af pH, koncentration og temperatur. Absorbansværdien er fast og kan bruges som reference.
Det teoretiske isosbestiske punkt for Congo red er kendt for at være 541 nm. Hvis den opnåede værdi er forskellig, er det kendt, at udstyret har bølgelængdedriftproblemer, og det skal kontrolleres af en specialiseret tekniker..
Ortiz et al. Beskriv et dyrkningsmedium fremstillet med Congo rødt farvestof og carboxymethylcellulose kaldet CMC agar for at detektere mikrobiologiske cellulitisstammer; dvs. cellulaseproducenter (endogluconeses, exoglucanases og ß-glucosidase).
Dette medium har en intens farve. Farven spredes ved virkningen af endoglucanase-enzymet, der bryder strukturen af carboxymethylcellulose. Dette antyder en positiv reaktion.
Faldet i viskositet og absorbans gør det muligt at kvantificere enzymets aktivitet. For eksempel i stammer af Streptomyces sp.
Congorød har en affinitet for polysaccharidstrukturer af visse stammer, hvilket giver identifikation af disse mikroorganismer. Blandt dem er Escherichia coli, og Shigella flexneri.
Congo røde agarplader bruges også til at opnå karakteristiske kolonier, som det er tilfældet med Azospirillum sp, giver skarlagenrøde kolonier, blandt andet.
En af de mest almindelige anvendelser af Congo red er dens anvendelighed til diagnosticering af amyloidose. Denne underlige sygdom består i den ekstracellulære ophobning af et unormalt protein i forskellige organer. Dette unormale protein fremstilles i knoglemarven og kaldes amyloid..
Congorød har en høj affinitet for dette stof. Denne egenskab er blevet brugt til at vise sin tilstedeværelse i histologiske vævsafsnit. Congo Red anvendes i forbindelse med hematoxylin / eosin til dette formål..
Foreningen af amyloidvævet og Congo-rødt sker gennem ikke-polære hydrogenbindinger mellem carboxylgrupperne og aminogruppen. Amyloidprotein tilvejebringer carboxylgrupperne (COOH) og Congo rød aminogruppen.
Amyloidvæv farves i forskellige nuancer, der spænder fra lyserød til dyb rød under lysmikroskopet. I mikroskoper med dobbelt polariseret lys observeres disse præparater med en patognomonisk æblegrøn dobbeltbrydning..
Det vil sige, de præsenterer dikroisme, da amyeloidfibrene er anisotrope. Denne observation bekræfter diagnosen.
Vævsfarvning med Congo red er kompatibel med andre diagnostiske metoder, såsom immuncytokemiske metoder, og det er endda muligt at genfarve.
Egenskaben ved at dreje mod ændringer i pH bruges af teknikken kaldet kromoendoskopi..
Denne teknik bruger farvestoffer og pH-indikatorer, der tillader påvisning af visse patologier. Blandt dem er brugen af Congo red, som kan afsløre tidlige kræftfoci i maveslimhinden, der bruges som en markør for surhed.
Teknikken er baseret på, at Congorød ved sur pH er sort. Derfor, efter at have placeret en opløsning af Congo-rød på maveslimhinden, vælges de områder, hvor der er bleghed, til at tage prøven til biopsi, det vil sige hvor der ikke er nogen syreproduktion. Dette antyder tilstedeværelsen af et kræftfokus eller tab af parietale celler..
Endnu ingen kommentarer