Det Blodudstrygning Det er en perifer blodudstrygning, der bruges til at analysere de komponenter, der findes i blodcirkulationen. Observation af en blodudstrygning giver hæmatologiske data, der er meget nyttige til diagnose og opfølgning af mange patologier..
Blodudstrygningen gør det muligt at kvantificere antallet af de forskellige typer hvide blodlegemer (leukocytformel) samt muliggøre analyse af morfologi og form af erytrocytter, leukocytter og blodplader.
Det kan detektere abnormiteter i antallet af celler, såsom: leukocytose eller leukopenier, lymfocytose eller lymfopeni, neutrofili eller neutropeni, trombocytose eller trombocytopenier og eosinofili. Celleform og abnormiteter i størrelsen kan også ses..
Derudover er det muligt at detektere forskellige typer anæmier, leukæmier og bakterie- eller blodparasitinfektioner..
Til dette er der forskellige typer udstrygninger, der udføres afhængigt af formålet med undersøgelsen. Der er tynde udstrygninger og tykke udstrygninger. Disse udstrygninger adskiller sig i udførelsesteknikken og i formålet med undersøgelsen..
Dem med fine dråber bruges som et supplement til komplet hæmatologi. Dette giver data om leukocytformlen ud over analysen af formen og morfologien for de tre celleserier, der udgør blodet: røde serier, hvide serier og blodplader. Selvom de også fungerer som et supplement til studiet af tyk blodfilm.
Tykt blodfilm bruges til diagnose af sygdomme forårsaget af hæmoparasitter, såsom malaria eller malaria, toxoplasmose, leishmaniasis, Chagas sygdom, babesiose og mikrofilariasis.
Artikelindeks
En god blodudstrygning skal opfylde visse egenskaber. Blandt dem kan vi nævne:
-Prøven skal opfylde minimumskvalitetskravene for at være repræsentativ.
-Prøveudtagningen skal udføres godt.
-Rettidig udførelse af udtværingen.
-Hvis det udføres med venøst blod, skal du bruge et antikoaguleringsmiddel, der ikke deformerer cellerne, og blande røret, inden du tager udstrygningen..
-Hvis det sker med kapillærblod, skal den første dråbe smides ud.
-Spredningen skal være homogen. Dette sikrer, at cellerne fordeles jævnt, og at der kan foretages en god analyse af blodcellerne med hensyn til form og antal..
-Udstrygningens sider skal være glatte fra start til slut.
-Udstrygningen skal respektere en margen på 1 til 2 mm til siderne af objektglasset.
-Udstrygningslaget skal gradvist falde i tykkelse fra begyndelsen til slutningen (tynd-drop udstrygning ved glidemetoden).
-Skal mærkes korrekt for at undgå forveksling af prøver.
-Fix og pletter passende for klar observation af blodelementer.
-Lad udtværingen tørre meget godt, inden du monterer præparatet under mikroskopet. Placering af olie nedsænkning på et vådt udstrygning vil medføre dannelse af miceller, der forhindrer cellerne i at blive set..
Perifere blodudstrygninger kan klassificeres i tyndt udstrygning og tykt udstrygning. Dem med et tyndt lag bruges til undersøgelse af leukocytformlen og morfologisk observation af blodlegemer. Du kan også se ekstracellulære bakterier såsom borrelia og intracellulære hæmoparasitter, såsom plasmodium, blandt andre..
I den fine klat kan parasitarterne identificeres, derfor er det en mere specifik teknik end den tykke klat, men den tykke klat er mere følsom, da det er en koncentrationsteknik, der anvendes til den udtømmende søgning efter ekstracellulære hæmoparasitter..
Der er to typer udtværede smådråber: dem, der udføres på dias og dem, der udføres på dækglas. De tykke udstrygninger udføres på objektglas.
Blodudstrygninger kan fremstilles ud fra en kapillær punktering eller en venøs prøve taget med antikoagulant. Hvis det er lavet af blod med antikoagulant, kan udstrygningen forberedes op til 2 timer efter at have taget prøven..
Der skal udvises forsigtighed ved anvendelse af antikoagulantia, der ikke deformerer blodceller. Den bedste mulighed er EDTA. Tværtimod bør brugen af antikoagulantia såsom trinatriumcitrat undgås..
Hvis prøven tages ved kapillær punktering, skal udstrygningen strækkes straks inden blodproppen.
Den første dråbe skal kasseres, så den næste dråbe kan undslippe spontant for at undgå fortynding af prøven med vævsvæsken. Det er den mest anbefalede teknik til observation af cellemorfologi, da blodet ikke har nogen additiver.
Til observation af hæmoparasitter konkluderede Solari et al. I deres forskning, at begge teknikker (venepunktur og kapillær) er lige så effektive..
Blodudstrygningen kan udføres manuelt på objektglas eller på dækglas eller objektglas. Det er også muligt gennem automatiseret udstyr.
Det er den teknik, som de fleste laboratorier foretrækker på grund af den nemme håndtering.
Brug en Pasteur-pipette til at placere en ikke særlig tyk eller meget fin dråbe blod i midten af den ene ende af et rent mikroskopglas..
Udstrygningen er lavet ved hjælp af et andet dias med en jordende. Det grundige glasskinne placeres vinkelret på den modsatte ende af dråben..
Den læner sig til en vinkel mellem 30-45 ° og glider mod faldet; Når det berøres, udvides det lineært over kanten af jorden og med en konstant og defineret bevægelse vender arket tilbage; inden enden løftes gliden.
På denne måde spredes et homogent lag over overfladen af det modtagende lysbillede..
Udstrygningen får lov til at tørre. Den fikseres derefter og farves med den foretrukne plet. Lad det tørre godt, inden du ser det under mikroskopet. En dråbe olie placeres på ansigtet, der præsenterer udstrygningen og observeres under et lysmikroskop.
I denne type udstrygning kan der skelnes mellem tre definerede områder: hovedet, kroppen og halen. Hovedet svarer til det område, hvor udstrygningen starter, det er det tykkeste område, og det er ikke godt at observere.
Kroppen er den centrale eller mellemliggende del af udstrygningen, det er det bedste område at observere under mikroskopet, fordi der er cellerne jævnt fordelt og deres morfologi bevares.
Halen svarer til den sidste del af udtværingen; her er fordelingen ikke længere ensartet, og erytrocytmorfologi har tendens til at gå tabt.
I denne teknik spiller den en grundlæggende rolle:
-Rengøring og affedtning af objektglasset: sikrer en god glidning af prøven.
-Dråbestørrelsen: med meget store dråber opnås en tykkere og længere udstrygning, med en meget lille dråbe bliver spredningen kortere og ekstremt fin.
-Den hastighed, der anvendes i forlængelsen: jo lavere hastighed udstrygningen bliver tyndere, jo højere hastighed bliver den tykkere.
-Udførelsesvinklen: jo mindre vinklen er, jo finere udstrygningen er, jo højere er vinklen, tykkere.
Det bruges ikke i vid udstrækning, fordi det er besværligt at håndtere de skrøbelige dækglas, men det giver store fordele, da der opnås en bedre fordeling af cellerne gennem udtværingen..
En ikke meget tyk eller meget fin dråbe placeres i midten af et dækglas. Umiddelbart placeres endnu et dækglas oven på det på en sådan måde, at spidserne på begge dækglas stikker ud og danner en stjerne.
Dråben spredes spontant over overfladen af begge dækglas. I slutningen af forlængelsen glider hver lamella hurtigt til den modsatte side af hinanden (den ene til højre og den anden til venstre).
Teknikken giver to udtværinger i stedet for en.
De placeres til tørring med den spredte side opad. Når det er tørt, er det fikseret og farvet med den valgte teknik. Lad det tørre. En dråbe nedsænkningsolie placeres på et objektglas, udstrygningen placeres med udstrygningssiden nedad og observeres under et mikroskop..
For at opnå en god udtværing til denne teknik er det vigtigt at:
-Rengøring af dækglas (hjælper med at skubbe prøven godt).
-Dråbestørrelsen (påvirker udstrygningens tykkelse).
-Den hastighed, hvormed dækglas adskilles (påvirker udstrygningens homogenitet).
De kan gøres gennem ethvert af disse udstyr: Spinner og Autoslide.
Spinner består af at placere et dias med en dråbe blod på en speciel centrifugeplade. Prøven centrifugeres ved høje hastigheder; på denne måde dannes en homogen og fin udstrygning af prøven. Ulempen ved muligheden for hæmolyse af prøven.
Autoslide er et instrument, der mekanisk udfører bevægelser til udførelse af udstrygningen på dias. Du kan også rette og plette udstrygningen. Det kan endda tilpasses nogle automatiske hæmatologitællere.
For at søge efter hæmoparasitter anbefales det at udføre to udstrygninger: en med en fin dråbe og en med en tyk dråbe..
Udfør en kapillær punktering, rengør den første dråbe. Placer en fin dråbe på et dias og smør som tidligere forklaret. For den tykke perle skal du placere en stor perle på en anden glide og spredes til en 1,55 mm firkant. Lad de to udtværinger tørre.
For dem med fine dråber kan blandt andet Giemsa eller Wright pletter bruges. Giemsa eller May-Grunwald Giemsa-plet anbefales til tykke udstrygninger.
Udstrygningen fikseres i 3 minutter med methanol, drænes og får lov til at tørre igen. Udstrygningen dækkes derefter med Giemsa-plet i 10-15 minutter. Det vaskes med destilleret vand og får lov til at tørre. For at observere under mikroskopet placeres en dråbe nedsænkningsolie.
Udstrygningen er dækket af Wrights plet i 5 minutter. Kasser og placer bufferopløsningen ved pH 6,8 i 6 minutter. Blæs præparatet for at homogenisere. Vask med destilleret vand og lad det tørre. Overhold under mikroskopet.
Findes i praktikanter med fin drop-teknik med dias.
Det er fordi den udførte bevægelse ikke var konstant under spredningen, hvilket gjorde stop og genstart.
De har to årsager: den ene skyldes, at jordskredet er løftet, inden det når den anden ende af glideren. I dette tilfælde er den ekstremt tyk og kort.
På den anden side, hvis udstrygningen er kort, men tynd, skyldes det, at dråbestørrelsen var meget lille..
Det har flere årsager: den ene er, at jordkanten er defekt, at trykket, der udøves på den modtagende glide, øges på spredningstidspunktet, eller at glidens jordkant slides.
De skyldes brugen af fedtede udstrygninger (dårligt vasket og affedtet).
Dråber, der er for store, producerer meget tykke udstrygninger fra start til slut, og meget små dråber producerer meget fine udstrygninger.
Blodceller kan ses i en blodudstrygning. Blandt dem er:
Antallet af erytrocytter eller røde blodlegemer er ca. 5 x 106 mm3 i mand og 4,5 x 106 hos kvinder. Røde blodlegemer er formet som bikoncave skiver med en central fysiologisk bleghed. Kan ses separat (normal) eller stabling i rouleaux (unormal).
Udstrygninger viser også poikilocytose (røde blodlegemer i forskellige former), anisocytose (røde blodlegemer i forskellige størrelser), anisopoikilocytose (forskellige former og størrelser), anisokromi (forskellige farver), erythroblaster (umodne røde blodlegemer), mikrocytose (mindre røde blodlegemer)) og makrocytter (større erytrocytter).
Når de præsenterer en mangel i mængden af hæmoglobin, og den centrale bleghed øges, siges det, at der er hypokromi. Når en normal rød serie observeres, rapporteres den som normocytisk og normokrom..
Den normale mængde varierer fra 5.000 til 10.000 mm3. De ændres i infektiøse processer, i allergier og i leukæmi. I blodudstrygningen kan der skelnes mellem flere typer, som forklares nedenfor.
De repræsenterer 55-65% af de samlede leukocytter. De måler mellem 10-15 um. De har en segmenteret eller flettet kerne, der adopterer forskellige morfologier, derfor kaldes den polymorfonuklear.
De har rigelige neutrofile granuler i deres cytoplasma og nogle azurofiler. Forøgelse af bakterieinfektioner (neutrofili), fald i virusinfektioner (neutropeni).
Morfologiske abnormiteter såsom pleokaryocytose (hyper-segmenterede kerner), bue (umodne celler) eller makropolicitter (ovalformede og store) kan observeres..
Andre ændringer:
-Giftige granuleringer
-Pseudo Pelger neutrofiler (kernen er ulovlig eller bilobet).
-Döhle-kroppe: mørkeblå cytoplasmatiske indeslutninger.
-Øget cytoplasmatisk basofili.
-Intracytoplasmiske vakuoler.
-Cellulær pyknose (tab af internukleare broer).
De repræsenterer 1-3% af de samlede hvide blodlegemer. De måler 9-10 um. De er kendetegnet ved tilstedeværelsen af rigelige acidofile cytoplasmatiske granuler og få azurofiler. Dens kerne har to lobulationer. Deres antal øges i allergier og sygdomme af parasitisk oprindelse.
De er ekstremt sjældne og repræsenterer 0-1% af leukocytter. De måler 10-12μm. Kernen er normalt uregelmæssig i grænser og kan være bilobed, men den observeres ikke på grund af det store antal basofile grove granuleringer i dens cytoplasma. Meget sjældent kan der ses basofili.
De er små celler med basofil cytoplasma, med en veldefineret, rund kerne med kondenseret kromatin. Kernen omfatter næsten hele cellen. De repræsenterer 26-40% af blodleukocytter. De øges i virusinfektioner (lymfocytose). Reaktive lymfocytter kan ses.
Celler større end lymfocytter med større cytoplasma og løsere kromatin ovale kerner. De måler 9-12μm. Cytoplasmaet er rigeligt og vises normalt lysegråblåt med standardfarvningsteknikker. Vakuolerede monocytter og monocytose kan observeres blandt ændringerne..
De måler mellem 1,5-3 um. Dens form er rund eller oval. Den normale værdi varierer fra 150.000 til 350.000 blodplader / mm3. De kan falde i nogle virusinfektioner. De har ingen kerne og er farvet lilla. Abnormaliteter kan ses i denne serie, såsom makro- eller mikroplader, trombocytose eller trombocytopeni og blodpladefragmenter.
Hæmoparasitter, såsom det forårsagende middel til malaria eller malaria (parasitter af slægten Plasmodium), kan ses i blodudstrygninger. Af denne grund er det vigtigt, at udstrygningen analyseres manuelt, da automatiseret udstyr overser dette fund..
I patologier såsom tilbagefaldende feber eller Lyme-sygdom kan dets årsagsmiddel observeres. I dette tilfælde svarer det til spiroketerne Borrelia recurrenti Alligevel Borrelia burgdorferi i blodudstrygningen.
Alvorlige tilfælde observeres blandt andet leukæmi, leukæmoid reaktioner og leukoerythroblastic reaktion. I bakterielle infektioner kan der være små afvigelser til venstre (tilstedeværelse af skurke). Erytroblaster kan også ses i nogle anemier.
Endnu ingen kommentarer