Antistreptolysin O-kvantificering, begrundelse, teknik, patologier

3443
Sherman Hoover

Det antistreptolysin O er det antistof, der genereres som reaktion på en infektion forårsaget af bakterierne Streptococcus pyogenes eller også kendt som gruppe A beta-hæmolytisk streptokokker, der producerer to typer eksotoksiner med hæmolytisk aktivitet kaldet “S” og “O” streptolysiner..

Streptolysin S er ansvarlig for beta-hæmolyse, der forekommer i blodagar, og selvom den er giftig for visse celler i immunsystemet, er den ikke antigen. Mens streptolysin O, der er labilt mod ilt, er ansvarlig for hæmolysen, der forekommer under blodagaren, og dette er antigent.

Streptococcus pyogenes / Diagram over, hvad der sker i ASTO-testen (agglutinationsreaktion). (Antistoffer bundet til latexpartikler, der indeholder det specifikke antigen). Kilde: Bruger: Graham Beards [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0))] / Alejandro Porto [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses / by-sa / 3.0)]

Derfor, når cellerne i immunsystemet interagerer med streptolysin O, dannes der et specifikt immunrespons, som genererer aktivering af B-lymfocytter. Disse celler producerer antistoffer rettet mod streptolysin O. Derfor kaldes antistofferne antistreptolysin O.

Det Streptococcus pyogenes producerer forskellige patologier, blandt hvilke er: tonsillitis, erysipelas, impetigo, puerperal feber, skarlagensfeber og septikæmi. Antistreptolysin O-antistoffer vises 8 til 30 dage efter infektionens begyndelse.

De fleste af disse infektioner er meget almindelige i befolkningen, så det er almindeligt, at folk har antistreptolysin O-antistoffer i deres blod. Lavtitere indikerer en tidligere infektion med denne bakterie, men en høj eller stigende titre indikerer en nylig eller igangværende infektion..

Artikelindeks

  • 1 Kvantificering af antistreptolysin O-antistoffer
  • 2 Baggrund for ASTO-teknikken
  • 3 teknikker
    • 3.1 - Semikvantitativ teknik
    • 3.2 - Kvantitativ teknik
  • 4 Patologier med høje titre af antistreptolysin O
    • 4.1 Post streptokok autoimmune sygdomme
  • 5 Referencer

Kvantificering af antistreptolysin O-antistoffer

I laboratoriet kan antistreptolysin "O" -antistoftiter måles ved en serologisk test. Antistreptolysin O (ASTO) -testen er baseret på en agglutinationsreaktion med latex.

Det kan gøres halvkvantitativt, rapportering i kryds eller titeren kan også kvantificeres. Det er normalt og ikke signifikant at finde værdier på op til 200 IE / ml eller Todd enheder / ml. Over denne værdi betragtes den som positiv og er klinisk signifikant..

Denne test kræver ikke, at patienten faste. Serum bruges som en prøve, dvs. patientens blod ekstraheres og anbringes i et rør uden antikoagulant, hvorefter det centrifugeres for at opnå serum.

ASTO-teknikgrundlag

Teknikken anvender latexpartikler som understøtning til at fiksere streptolysin O-antigenet. De absorberede antigenpartikler reageres med patientens serum. Hvis patienten har antistreptolysin O-antistof, vil disse binde til antigenet, der er bundet til latexpartiklen.

Denne binding forårsager agglutination, der er makroskopisk synlig. Intensiteten af ​​reaktionen er direkte proportional med koncentrationen af ​​tilstedeværende antistoffer.

Teknikker

- Semikvantitativ teknik

Intensiteten af ​​reaktionen kan semi-kvantificeres i kryds. For at gøre dette tages en serologisk reaktionsplade og placeres:

50 µl serum og 50 µl ASTO-reagens. Bland godt med et tandstikker af træ og læg det i en automatisk mixer i 2 minutter. Holde øje. Hvis en automatisk rotator ikke er tilgængelig, skal den gøres manuelt.

Fortolkning

Klumpfri suspension (ensartet): Negativ

1. + = svag reaktion

2. ++ = let reaktion

3. +++ = moderat reaktion

4. ++++ = stærk reaktion

Sera, der er positive med 3 og 4 kryds, kan kvantificeres.

- Kvantitativ teknik

Til kvantificering af titeren fremstilles seriefortyndinger 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16..

For at gøre dette skal du gøre som følger: Der tages 4 reagensglas eller Kahn-rør, og der placeres 0,5 ml fysiologisk saltvand på dem alle. Derefter tilsættes 0,5 ml patientserum til det første rør. Det blander godt. Det rør svarer til fortyndingen 1: 2.

Derefter overføres 0,5 ml til rør 2 og blandes godt. Dette rør svarer til fortyndingen 1: 4 og så videre, indtil den ønskede fortynding er nået.

Tag 50 µl af hver fortynding og reager med 50 µl ASTO-reagens på en agglutinationsplade, som forklaret i den semi-kvantitative teknik.

Fortolkning

Den højeste fortynding, hvori der observeres synlig agglutination, tages i betragtning. Beregningerne udføres som følger:

ASTO = invers af højeste positive fortynding x tekniksensitivitet (konstant).

Eksempel: Patient med positiv reaktion op til 1: 8

ASTO = 8 x 200 IE / ml = 1600 IE / ml eller Todd enheder / ml.

Referenceværdi

Normal voksen: op til 200 IE / ml

Normale børn: op til 400 IE / ml

anbefalinger

Det tilrådes at montere en positiv og en negativ kontrol med patienterne for at sikre, at reagenset er i optimal tilstand. Hvis den positive kontrol ikke agglutineres, eller den negative kontrol agglutineres, kan reagenset ikke bruges..

Reaktionen skal fortolkes efter 2 minutter, efter dette tidspunkt er den ikke gyldig, hvis der er agglutination. Det handler om falske positive.

Hyperlipemiske sera forstyrrer reaktionen. De kan give falske positive.

En isoleret ASTO-værdi er ikke til stor hjælp. Det skal ledsages af symptomerne.

Derudover tilrådes det at foretage mindst 2 ASTO-målinger, når der er mistanke om reumatisk feber eller post-streptokok glomerulonephritis, dette for at demonstrere stigningen i antistreptolysin O-niveauer og dermed bekræfte diagnosen..

Patologier med høje titere af antistreptolysin O

Anti-streptolysin antistoffer øges efter at have lidt en infektion af Streptococcus pyogenes o Gruppe A ß-hæmolytisk streptokokker.

Disse inkluderer: akut faryngitis, skarlagensfeber, impetigo, erysipelas, puerperal feber og septikæmi.

Nogle patienter, der har lidt for nylig eller tilbagevendende streptokokinfektioner, kan udvikle autoimmune sygdomme som en følgetilstand eller komplikation af post-streptokokinfektion, såsom akut glomerulonephritis og reumatisk feber..

Post streptokok autoimmune sygdomme

Gigtfeber

Det er en inflammatorisk komplikation eller følgesygdom, der kan forekomme 1 til 5 uger efter en streptokokinfektion. Antistreptolysin-O-titre stiger markant 4 til 5 uger efter sygdomsudbrud.

En høj ASTO-titer styrer diagnosen, men er ikke relateret til sygdommens sværhedsgrad, og dens fald indebærer ikke forbedring.

Antistreptolysin O-antistoffer krydsreagerer mod kollagen og muskelfibre, der påvirker visse organer (blandt andet hjerte, hud, led og nervesystem).

Denne komplikation eller efterfølger forårsager hjerteinddragelse, feber, generel utilpashed, ikke-suppurativ vandrende polyartritis, chorea osv..

Akut glomerulonephritis

Akut glomerulonephritis er en ikke-suppurativ følge, der opstår på grund af aflejring af antigen-antistofkomplekser på den glomerulære basalmembran.

Dannelse og cirkulation af antigen-antistofkomplekser (ag-ac) genereret af streptokokinfektioner kan føre til ekssudative ændringer og betændelse i glomeruli med proteinuri og hæmaturi.

Disse ag-ac-komplekser aflejres i glomerulus og aktiverer komplementkaskaden, hvilket resulterer i glomerulær endotelbeskadigelse. Derfor betragtes det som en autoimmun sygdom, da individets immunsystem beskadiger deres eget væv..

Antistreptolysin O-antistoffer er meget høje, og komplementniveauer er lave.

Referencer

  1. Wiener Laboratories. ASO latex. 2000. Fås på: wiener-lab.com.ar
  2. Wikipedia-bidragydere. "Anti-streptolysin O." Wikipedia, The Free Encyclopedia. Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23. januar 2019. Web. 19. juli 2019.
  3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolysin O titer i sundhed og sygdom: niveauer og betydning. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Fås på: ncbi.nlm.nih
  4.  Sen E, Ramanan A. Sådan bruges antistreptolysin O-titer. Arch Dis Child Educ Pract Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Fås på: ncbi.nlm.nih
  5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. (5. udgave). Argentina, redaktionelt Panamericana S.A.
  6. González M, González N. 2011. Manual of Medical Microbiology. 2. udgave, Venezuela: Direktoratet for medier og publikationer ved University of Carabobo.

Endnu ingen kommentarer